Comparación de la PCR anidada y PCR convencional en el diagnóstico de Plasmodium vivax y P. falciparum

Resumen

La malaria es una enfermedad causada por Plasmodium sp., y en Colombia anualmente se registran aproximadamente 160.000 casos donde el 75% son producidos por P. vivax y 24% por P. falciparum. El diagnóstico molecular se realiza mediante PCR anidada que es una amplificación general seguida de una específica, utilizando dos pares de cebadores diferentes. En este trabajo se comparó la sensibilidad y especificidad de la PCR anidada con la PCR convencional para identificar P. vivax y P. falciparum en ADN de sangre de pacientes. Como muestra se seleccionaron 18 pacientes identificados mediante gota gruesa como positivos para malaria. En el aislamiento del ADN se utilizaron 3 protocolos: Heidari, Chelex^® 100 y Kit comercial de Promega. En la PCR anidada y convencional se emplearon cebadores que identifican P. falciparum y P. vivax. El resultado de las amplificaciones obtenidas con la PCR convencional fueron similares a las obtenidas con la PCR anidada, demostrando que poseen la misma especificidad y sensibilidad, lo que permite concluir que la realización de la PCR convencional es suficiente para el diagnóstico de P. vivax y P. falciparum, reduciendo tiempo y costos en la identificación. La PCR es el mejor método para el diagnóstico de Malaria, por ser más sensible y especifico, comparado con la prueba rápida y el examen microscópico de gota gruesa, permitiendo detectar la presencia del parásito en las primeras fases de la enfermedad, cuando su carga parasitaria es mínima, y además otorga la posibilidad de identificar casos de infecciones mixtas.